粒細(xì)胞檢測(cè)
粒細(xì)胞可由其在瑞氏染色下的表現(xiàn)分為中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞三類(lèi)，絕大部分的粒細(xì)胞是中性粒細(xì)胞。 中性粒細(xì)胞的7個(gè)階段標(biāo)記物：粒單系祖細(xì)胞、原始粒細(xì)胞、早幼粒細(xì)胞、中幼粒細(xì)胞、晚幼粒細(xì)胞、桿狀核、分葉核。
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實(shí)驗(yàn)介紹
【技術(shù)原理】
流式利用不同熒光物質(zhì)標(biāo)記的單克隆抗體，與待測(cè)成分作用，然后上流式細(xì)胞儀檢測(cè)待測(cè)細(xì)胞。待測(cè)細(xì)胞隨流動(dòng)室內(nèi)的流動(dòng)鞘液排列成單列，一個(gè)個(gè)迅速通過(guò)激光聚焦區(qū)，激光在對(duì)每個(gè)細(xì)胞進(jìn)行照射時(shí)可同時(shí)得到前向角散射和側(cè)向角散射2種散射光以及激發(fā)熒光標(biāo)記物發(fā)出的信號(hào)，利用這些信號(hào)，可計(jì)算出相對(duì)含量，從而得到細(xì)胞群的相對(duì)比值。
粒細(xì)胞可由其在瑞氏染色下的表現(xiàn)分為中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞三類(lèi)，絕大部分的粒細(xì)胞是中性粒細(xì)胞。 中性粒細(xì)胞的7個(gè)階段標(biāo)記物：粒單系祖細(xì)胞、原始粒細(xì)胞、早幼粒細(xì)胞、中幼粒細(xì)胞、晚幼粒細(xì)胞、桿狀核、分葉核。
我們常用的檢測(cè)指標(biāo)
中性粒細(xì)胞（人）：CD15、CD16、CD49d（-）
噬堿性粒細(xì)胞（人）：CD123、CD203c、CD117(-)
噬酸性粒細(xì)胞（人）：CD11b、CD193、EMR1
中性粒細(xì)胞（鼠）：CD11b、 Ly6G、CD115（-）
噬堿性粒細(xì)胞（鼠）：CD200R3、 FcεRIα
噬酸性粒細(xì)胞（鼠）：CD11b、 CD193、 F4 / 80
【實(shí)驗(yàn)流程】
Step1：制成單細(xì)胞懸液（組織樣本）
Step2：溶血（細(xì)胞樣本無(wú)需進(jìn)行此步驟）
Step3：離心去上清
Step4：調(diào)整細(xì)胞密度
Step5：加入相應(yīng)的標(biāo)記抗體
Step6：孵育
Step7：洗滌后離心去上清
Step8：上機(jī)檢測(cè)
注意事項(xiàng)
1、為保證所得結(jié)果的可靠性，每次實(shí)驗(yàn)前應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)熒光微球檢測(cè)儀器的變異系數(shù)；
2、每次應(yīng)做陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照、質(zhì)控對(duì)照、以確保將各種試劑及操作過(guò)程對(duì)結(jié)果的影響降至最低；
3、外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMC）是一些科研實(shí)驗(yàn)中經(jīng)常用的材料，是利用Ficoll從全血中提取得到，主要為淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞；需要檢測(cè)粒細(xì)胞等多形核細(xì)胞，就需要避免用PBMC需提供全血。
送檢與交付標(biāo)準(zhǔn)
| 樣品類(lèi)型 | 樣品需求 | 運(yùn)輸條件 |
|---|---|---|
| 組織 | 離體后組織制成單細(xì)胞懸液，加入PBS培養(yǎng)基內(nèi) | 常溫運(yùn)輸 |
| 活細(xì)胞 | 樣本量：1*106個(gè)細(xì)胞/TEST，加入PBS培養(yǎng)基內(nèi) | 常溫運(yùn)輸 |
| 血液 | 將血液采集在EDTA肝素鈉的抗凝采血管內(nèi) | 常溫運(yùn)輸 |
電話：400-691-6686
在線時(shí)間：8:00-24:00
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