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這是 qPCR 擴增的全過程，分 3 個階段：

1. 起始期：剛開始循環(huán)，DNA 剛復制，熒光信號弱，和背景噪音差不多，儀器檢測不到明顯變化；

2. 指數(shù)期：DNA 片段以 2?的速度快速復制，熒光信號呈指數(shù)增長，這個階段的擴增效率最穩(wěn)定，是最能反映模板初始量的階段；

3. 平臺期：原料耗盡，擴增減速，熒光信號不再增加，曲線趨于平緩。

CT 值：“熒光達標” 時的循環(huán)數(shù)。上圖中那條灰色的閾值線（Threshold），是儀器設定的可檢測熒光信號閾值。CT 值（Cycle Threshold），就是熒光信號剛好跨過這條門檻時，PCR 已經跑了多少個循環(huán)。

綠色曲線：在更早的循環(huán)就達標 → CT 值更?。ㄕf明它的初始量多，只需要跑幾圈就到閾值線）

 紅色曲線：需要更多循環(huán)才能達標 → CT 值更大（說明它初始含量低，需要多跑幾圈才能到閾值線）。

qPCR 的定量原理很直接：如果樣品里的目標基因初始含量越高，DNA 復制到 “能被檢測到” 的速度就越快，對應的 CT 值就越?。环粗跏己吭降?，CT 值就越大。

比如

 過表達（OE）組的 CT 值 < 對照組 → 說明目標基因表達量更高

敲低（KD）組的 CT 值 > 對照組 → 說明目標基因表達量更低。

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