小鼠腸炎模型構(gòu)建方法詳解
2025-02-25 16:10:45
來(lái)源/作者：普拉特澤-生物醫(yī)學(xué)整體課題外包平臺(tái)
小鼠腸炎模型是研究腸炎發(fā)病機(jī)制、評(píng)估藥物療效的重要工具，普拉特澤生物承接小鼠腸炎模型等動(dòng)物實(shí)驗(yàn)相關(guān)服務(wù)上萬(wàn)例，積累了操作大量經(jīng)驗(yàn)，可承接動(dòng)物實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)。
下面我們進(jìn)入正題——幾種常見(jiàn)的小鼠腸炎模型構(gòu)建方法的詳解：
一、DSS誘導(dǎo)法
?DSS溶液配制?：
●稱取一定量的DSS，使用水溶解，配置成2%~5%（w）的DSS水溶液。DSS溶液配制好完成后可在4℃避光保存。
?造模過(guò)程?：
●將小鼠按照體重隨機(jī)分組。
●將小鼠水瓶?jī)?nèi)的水溶液更換為DSS水溶液，按照5ml/只/天的量進(jìn)行準(zhǔn)備，隔兩天后更換新的DSS溶液（DSS給藥時(shí)為day1，在day3、day5更換DSS溶液）。
急性模型：第8天將DSS溶液更換為不含DSS的清水。
慢性模型：第8天將DSS溶液更換為不含DSS的清水，清水?dāng)z取持續(xù)14天后，重復(fù)前面的步驟2~3次。
?觀察與評(píng)估?：
●造模后持續(xù)觀察小鼠狀態(tài)，可以通過(guò)DAI評(píng)分判定小鼠成模情況。
●可以通過(guò)觀察結(jié)腸長(zhǎng)度以及病理組織情況來(lái)評(píng)估造模效果。
二、TNBS誘導(dǎo)法
?試劑配制?：
●將TNBS溶于水，配制成5%TNBS（w）水溶液。
●配制橄欖油與丙酮比例為1:4（v）的均勻混合溶液，使用該混合液將5%的TNBS稀釋為1%的TNBS溶液；或者使用無(wú)水乙醇將5%的TNBS稀釋為1%的TNBS溶液。
?三、造模過(guò)程?：
●小鼠背部去毛（1.5×1.5 cm），取配制好的1%的TNBS溶液150μL均勻涂抹在去毛位置。
●七天后，小鼠麻醉后使用1ml注射器通過(guò)軟管將100μL的1%TNBS緩慢注射進(jìn)入小鼠直腸內(nèi)（軟管插入直腸的長(zhǎng)度大約4 cm），小鼠倒立保持約1分鐘。
?觀察與評(píng)估?：
●造模后持續(xù)觀察小鼠狀態(tài)，通過(guò)DAI評(píng)分判定小鼠成模情況。
四、惡唑酮誘導(dǎo)法
?試劑配制?：
●配制橄欖油與丙酮比例為1:4（v）的均勻混合溶液。
●使用橄欖油/丙酮混合液溶劑，稱取一定量的惡唑酮，配置成3%的惡唑酮給藥溶液；或者使用50%的無(wú)水乙醇配制得到1%的惡唑酮給藥溶液。
?造模過(guò)程?：
●小鼠背部去毛（1.5×1.5 cm），取配制好的惡唑酮溶液150μL均勻涂抹在去毛位置。
●七天后，小鼠麻醉后使用1ml注射器通過(guò)軟管將100μL的惡唑酮給藥溶液緩慢注射進(jìn)入小鼠直腸內(nèi)（軟管插入直腸的長(zhǎng)度大約4 cm），小鼠倒立保持約1分鐘。
五、觀察與評(píng)估?：
造模后持續(xù)觀察小鼠狀態(tài)，通過(guò)DAI評(píng)分判定小鼠成模情況。
四、注意事項(xiàng)
→在進(jìn)行小鼠腸炎模型構(gòu)建時(shí)，需要嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)條件，確保小鼠的飼養(yǎng)環(huán)境、飲食等條件一致。
→在造模過(guò)程中，需要注意操作細(xì)節(jié)，如注射器的選擇、注射速度、注射量等，以避免對(duì)小鼠造成不必要的損傷。
→在觀察與評(píng)估階段，需要采用多種指標(biāo)綜合評(píng)估模型的成功與否以及炎癥的嚴(yán)重程度。
綜上所述，小鼠腸炎模型的構(gòu)建方法多種多樣，每種方法都有其特定的誘導(dǎo)機(jī)制和適用范圍。在選擇構(gòu)建方法時(shí)，需要根據(jù)研究目的和實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行綜合考慮。
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