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   大家好，今天普拉特澤生物跟大家一起學習一種特殊的病理染色——甲醇是剛果紅染色。剛果紅染色法特指用剛果紅將纖維素染色的方法。剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，常用的剛果紅染色法有兩種。普拉特澤生物病理平臺長期為大家提供剛果紅染色外包服務(wù)，本文我們先來看看什么是剛果紅染色？

   剛果紅染色法特指纖維素的染色法，剛果紅能把纖維素染成紅色復(fù)合物，對纖維二糖和葡萄糖無作用，可用此來鑒別纖維素或纖維素分解菌的分解作用。剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物。當纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅——纖維素的復(fù)合物便沒法形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。

        我們常用的剛果紅染色法有兩種。

        方法一,先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅進行顏色反應(yīng)

        在長出菌落的培養(yǎng)基上，覆蓋質(zhì)量濃度為1 mg/mI。的CR溶液，10～15 min后，倒去CR溶液，加入物質(zhì)的量濃度為l mol/l的NaCI溶液，15 min后倒掉NaCl溶液，此時，產(chǎn)生纖維素酶的菌落周圍將會出現(xiàn)透明圈。 

        （加NaCl的原因：剛果紅是結(jié)合到培養(yǎng)基的多糖底物，但分解纖維素的細菌可以產(chǎn)纖維素酶，能分解這個多糖底物成為寡糖，這樣剛果紅就不能結(jié)合上去了，氯化鈉就可以使結(jié)合不牢的剛果紅洗去，這樣就留下大小不一的透明圈，大的透明圈分解纖維素的能力就強）

        方法二，在倒平板時就加入剛果紅

        配制質(zhì)量濃度為10 mg/mI的CR溶液，滅菌后，按照每200 mI。培養(yǎng)基加入1 mI。的比例加入CR溶液，混勻后倒平板。等培養(yǎng)基上長出茵落后，產(chǎn)生纖維素酶的菌落周圍將會出現(xiàn)明顯的透明圈。

        兩種剛果紅染色法的比較 : 剛果紅在篩選纖維素分解菌上的應(yīng)用已經(jīng)有超過20年的歷史，課本中給出了兩種方法。

        方法一是傳統(tǒng)的方法，優(yōu)缺點如下：

        優(yōu)點：這樣顯示出的顏色反應(yīng)基本上是纖維素分解菌的作用。

        缺點：操作繁瑣，加入剛果紅溶液會使菌落之間發(fā)生混雜；

        方法二的優(yōu)缺點如下：

        優(yōu)點：操作簡便，不存在菌落混雜問題，

        缺點1：由于在纖維素粉和瓊脂、土豆汁中都含有淀粉類物質(zhì)，可以使能夠產(chǎn)生淀粉酶的微生物出現(xiàn)假陽性反應(yīng)。但這種只產(chǎn)生淀粉酶的微生物產(chǎn)生的透明圈較為模糊，因為培養(yǎng)基中纖維素占主要地位，因此可以與纖維素酶產(chǎn)生的透明圈相區(qū)分。

        缺點2：有些微生物具有降解色素的能力，它們在長時間培養(yǎng)過程中會降解剛果紅而形成明顯的透明圈，與纖維素分解菌不易區(qū)分。

        好啦，剛果紅染色就簡單介紹到這里啦，如果您也正在準備剛果紅染色實驗或有剛果紅染色外包的需求歡迎直接聯(lián)系普拉特澤生物~