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高脂飲食誘導(dǎo)NAFLD模型的5大核心指標(biāo)及檢測方法【全面解析】

2025-04-02 14:21:17

來源/作者:普拉特澤-生物醫(yī)學(xué)整體課題外包平臺

    非酒精性脂肪肝(NAFLD)是全球最常見的慢性肝病之一,而高脂飲食(HFD)誘導(dǎo)的動物模型是研究NAFLD發(fā)病機制和藥物干預(yù)的重要工具。
普拉特澤生物為廣大生命科學(xué)研究人員提供非酒精性脂肪肝小鼠實驗,可根據(jù)實方案的要求選擇不同的檢測方法,本文就跟大家一起詳細(xì)介紹——高脂飲食誘導(dǎo)NAFLD模型的5大核心指標(biāo)
并提供 實驗檢測方法,幫助研究者準(zhǔn)確評估模型建立是否成功。
1. 肝臟組織病理學(xué)指標(biāo)(HE染色 & 油紅O染色)

檢測方法

⑴HE染色(蘇木精-伊紅染色):觀察肝細(xì)胞脂肪變性、炎癥浸潤和氣球樣變。

⑵油紅O染色:特異性染色肝組織中的脂滴,定量脂肪沉積程度。

⑶NAS評分(NAFLD Activity Score):根據(jù)脂肪變性(0-3分)、炎癥(0-3分)和肝細(xì)胞氣球樣變(0-2分)綜合評估NAFLD嚴(yán)重程度。

意義

脂肪變性 ≥5% 可判定為NAFLD模型成功。

NAS評分 ≥4分 提示NASH(非酒精性脂肪性肝炎)。

2. 血清生化指標(biāo)(ALT、AST、TG、TC)

檢測方法

①ALT(丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶) & AST(天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶):采用ELISA或生化分析儀檢測,反映肝損傷程度

②TG(甘油三酯) & TC(總膽固醇):評估血脂代謝異常,常用酶比色法測定。

意義

⑴ALT、AST升高 提示肝細(xì)胞損傷(通常HFD喂養(yǎng)8-12周后顯著上升)。

⑵TG、TC水平升高 表明脂代謝紊亂,是NAFLD的重要特征。

3. 肝臟脂質(zhì)含量(肝組織TG、TC測定)

①檢測方法

肝組織勻漿法:取肝組織勻漿后,用試劑盒(如Triglyceride Assay Kit)測定TG、TC含量。

②計算公式:

肝組織TG (mg/g)=測得TG濃度 (mg/mL)×勻漿體積 (mL)肝組織重量 (g)肝組織TG (mg/g)= 肝組織重量 (g)測得TG濃度 (mg/mL)×勻漿體積 (mL)

③意義

肝組織TG含量 >10 mg/g 表明顯著脂肪沉積。

與血清TG結(jié)合分析,可評估肝臟脂質(zhì)代謝異常程度。

4. 炎癥因子(TNF-α、IL-6、IL-1β)

⑴檢測方法

⒈ELISA法:定量檢測血清或肝組織勻漿中的炎癥因子水平。

⒉qPCR/Western Blot:檢測肝臟中炎癥相關(guān)基因(如TNF-α、IL-6)的表達(dá)。

⑵意義

TNF-α、IL-6升高 表明肝臟炎癥反應(yīng),提示NASH進(jìn)展。

結(jié)合HE染色(炎癥細(xì)胞浸潤)可更全面評估炎癥程度。

5. 肝纖維化指標(biāo)(膠原沉積、α-SMA、羥脯氨酸)

檢測方法

▲天狼星紅染色:觀察膠原纖維沉積(I、III型膠原)。

▲α-SMA免疫組化:檢測肝星狀細(xì)胞活化(纖維化標(biāo)志物)。

▲羥脯氨酸測定:定量肝組織膠原含量(纖維化程度)。

意義

▲纖維化評分(Ishak或METAVIR系統(tǒng)) 用于評估NAFLD向肝纖維化進(jìn)展。

▲α-SMA陽性率升高 提示肝星狀細(xì)胞激活,纖維化啟動。

6.結(jié)論

高脂飲食誘導(dǎo)的NAFLD模型成功與否,需綜合評估 肝臟病理、血清生化、脂質(zhì)代謝、炎癥反應(yīng)和纖維化 這5大核心指標(biāo)。
通過 HE染色、油紅O染色、ALT/AST檢測、TG/TC測定、ELISA(炎癥因子)和天狼星紅染色 等方法,可系統(tǒng)分析NAFLD

選擇 [普拉特澤生物] 的理由:

▲豐富的模型選擇: 我們提供多種肝纖維化模型,滿足您不同的研究需求。

▲專業(yè)的服務(wù)團(tuán)隊: 我們的團(tuán)隊擁有豐富的經(jīng)驗,可為您提供專業(yè)的模型選擇、實驗設(shè)計和數(shù)據(jù)分析服務(wù)。

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