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ELISA檢測實(shí)驗(yàn)報(bào)告(二)

2024-08-30 11:28:49

來源/作者:普拉特澤-生物醫(yī)學(xué)整體課題外包平臺

    Question:ELISA實(shí)驗(yàn)的方法有哪些?(普拉特澤生物提供長期穩(wěn)定的ELISA實(shí)驗(yàn)外包服務(wù))

    答:

一、 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/span>

通過Elisa實(shí)驗(yàn)技術(shù)檢測各樣本中目的蛋白的表達(dá)。

二、 實(shí)驗(yàn)樣本

三、 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

1.標(biāo)準(zhǔn)品檢測值

2.標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)準(zhǔn)曲線

1  cTn-1 標(biāo)準(zhǔn)曲線

   標(biāo)準(zhǔn)曲線結(jié)果顯示,本次 cTn-1 檢測結(jié)果可信。


3. 樣品檢測結(jié)果

圖2  Elisa檢測柱狀圖

四、 結(jié)果說明

    如圖所示,與Sham組相比,3個(gè)CVB3病毒處理組無顯著性差異。

五、 ELISA實(shí)驗(yàn)原理

往預(yù)先包被的微孔中依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB 在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的cTn-1呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm波長下測定吸光度 (OD ),計(jì)算樣品濃度。

六、 實(shí)驗(yàn)通用儀器及試劑

1. 主要儀器

2.主要試劑


六、重溫一下ELISA實(shí)驗(yàn)步驟

1.樣品處理

血清:3000xg離心10分鐘,取上清即可檢測。

2.ELISA檢測步驟(以試劑盒操作說明書為準(zhǔn))

(1)制備好所有試劑、工作標(biāo)準(zhǔn)品和樣品。

(2)從板架上移除多余的微孔板條,將它們放入裝有干燥劑包的鋁箔袋中,重新密封并4oC存儲。

(3)向適當(dāng)?shù)目字屑尤?/span>50μL樣品和標(biāo)準(zhǔn)品。

(4)每孔加入50μL抗體混合物。

(4)蓋好孔,在室溫下溫育1小時(shí),400rpm搖動。

(5)棄去溶液并用洗滌緩沖液洗滌3次。

(6)向每個(gè)孔中加入100μlTMB,400rpm避光室溫孵育100min。

(7)每孔中添加100μL終止液,混勻1min,450 nm處讀取吸光值。

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