欧美精品日韩在线视频-久久视频精彩在线观看-精品少妇人妻一区二区黑-欧美日韩中文字幕人妻-丁香九月婷婷综合在线-久久久亚洲熟妇熟女一区-久久久久免费看片-日本中文字幕人妻少妇在线-女同久久另类99精品国产,欧美 另类 自拍偷拍,中文字幕人妻系列懂色av,久久久亚洲精品男人的天堂

首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 【科研專題】自噬研究全解析（二）想研究自噬流？這幾種檢測(cè)方法你得知道！

【科研專題】自噬研究全解析（二）想研究自噬流？這幾種檢測(cè)方法你得知道！

2025-04-28 13:50:16

來(lái)源/作者：普拉特澤-生物醫(yī)學(xué)整體課題外包平臺(tái)

    大家好！今天普拉特澤生物繼續(xù)跟大家一起學(xué)習(xí)【科研專題】自噬研究全解析（二）。想研究自噬流？這幾種檢測(cè)方法你得知道！

自噬，這一細(xì)胞內(nèi)高度保守的降解過(guò)程，就像細(xì)胞專屬的 “清潔隊(duì)”，能清除受損的蛋白質(zhì)、細(xì)胞器，維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)，在發(fā)育、免疫和疾病發(fā)生發(fā)展等多個(gè)生理、病理過(guò)程中扮演關(guān)鍵角色。自噬流，描述的正是自噬發(fā)生過(guò)程中，自噬體形成、與溶酶體融合，以及底物降解的這一動(dòng)態(tài)流程。檢測(cè)自噬流，對(duì)理解自噬機(jī)制、疾病發(fā)生發(fā)展及尋找干預(yù)靶點(diǎn)至關(guān)重要。


檢測(cè)自噬流的方法有多種，以下是一些常見(jiàn)的方法：


電鏡觀察自噬體的形成——自噬檢測(cè)金標(biāo)準(zhǔn)

自噬體屬于亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，需要使用透射電子顯微鏡觀察自噬體的形態(tài)。


電鏡檢測(cè)自噬主要是基于辨認(rèn)自噬體結(jié)構(gòu)特征


Western blot 檢測(cè)自噬相關(guān)蛋白

LC3貫穿整個(gè)自噬過(guò)程，是目前公認(rèn)的自噬標(biāo)記物。利用WB檢測(cè)LC3- 11/I比值的變化以評(píng)估自噬的強(qiáng)弱。LC3-I/II 的形成和降解是一個(gè)動(dòng)態(tài)過(guò)程，瞬時(shí)LC3-I I表達(dá)不能反映自噬程度，需增加自噬的抑制劑、自噬的激動(dòng)劑，正反證明自噬的發(fā)生。


p62作為自噬的重要受體，主要依賴于自噬途徑進(jìn)行降解。因此，P62的蛋白水平也常常用來(lái)指示自噬的降解情況。


LC3 雙熒光標(biāo)記法：觀測(cè)自噬流的神器

mRFP-GFP-LC3 雙熒光自噬指示體系讓自噬研究更上一層樓！自噬流的順暢對(duì)細(xì)胞生理功能至關(guān)重要哦！


這個(gè)方法是用同時(shí)帶有 RFP 和 GFP 的病毒感染細(xì)胞。GFP 在酸性環(huán)境下會(huì)淬滅，而 mRFP 不受影響。當(dāng)自噬發(fā)生時(shí)，會(huì)看到明亮的黃色熒光，這就是被紅色熒光和綠色熒光同時(shí)標(biāo)記的自噬體啦！當(dāng)自噬體和溶酶體融合，pH 值降低，GFP 熒光淬滅，就只能看到紅色熒光了呢！所以，GFP 的減弱表示自噬溶酶體形成順利，GFP 越少，自噬小體到自噬溶酶體的流通就越順暢。反之，融合被抑制，自噬溶酶體進(jìn)程就受阻了哦！而 mRFP 一直穩(wěn)定表達(dá)，通過(guò) GFP 與 mRFP 的熒光比例就能評(píng)價(jià)自噬。


在研究自噬過(guò)程中，構(gòu)建自噬雙標(biāo)穩(wěn)株（如mRFP-GFP-LC3系統(tǒng)）需要配套的質(zhì)粒、病毒和抗體工具。以下是普拉特澤生物針對(duì)自噬雙標(biāo)研究的全面推薦，涵蓋質(zhì)粒、病毒和抗體，幫助您高效開(kāi)展實(shí)驗(yàn)。
常用的病毒工具推薦

（1）慢病毒（Lentivirus）


特點(diǎn)：高效感染多種細(xì)胞類型，可穩(wěn)定整合到基因組中，適合構(gòu)建穩(wěn)定細(xì)胞系。


推薦病毒：

Lv-LC3B-oe(mCherry,GFP)慢病毒

Lv-LC3-oe(RFP，GFP)慢病毒


以上兩種均可用于構(gòu)建自噬雙標(biāo)穩(wěn)株、監(jiān)測(cè)自噬體形成。


（2）腺病毒（Adenovirus）


特點(diǎn)：高感染效率，適合短期表達(dá)實(shí)驗(yàn)。


推薦病毒：

Adv-LC3B-oe(mCherry,GFP)腺病毒

Adv-LC3B-oe(RFP,GFP)腺病毒


（1）A549-mRFP-GFP-LC3B自噬雙標(biāo)穩(wěn)株

（2）MCF-7-mCherry-GFP-LC3自噬雙標(biāo)穩(wěn)株     

（3）SH-SY5Y-mCherry-GFP-LC3自噬雙標(biāo)穩(wěn)株

以下是我們構(gòu)建自噬雙標(biāo)穩(wěn)株的案例分享：

質(zhì)粒產(chǎn)品推薦


質(zhì)粒是構(gòu)建自噬雙標(biāo)穩(wěn)株的基礎(chǔ)工具，以下是常用的自噬相關(guān)質(zhì)粒：
（1）mRFP-GFP-LC3質(zhì)粒
用途：用于實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)自噬流（autophagic flux）。GFP在酸性環(huán)境中淬滅，而mRFP穩(wěn)定，因此可以區(qū)分自噬體（GFP+/mRFP+）和自噬溶酶體（mRFP+）。


推薦

ptfLC3（貨號(hào)：BR124）

pCDH-CMV-mRFP-GFP-hLC3B-EF1A-Puro（豐暉貨號(hào)：BR641）


（2）LC3相關(guān)質(zhì)粒
用途：LC3是自噬的標(biāo)志性蛋白，可用于研究自噬體的形成。

推薦：

pEGFP-LC3b（貨號(hào)：BR161）

pmCherry-LC3a（貨號(hào)：BR156）


（3）自噬相關(guān)基因過(guò)表達(dá)質(zhì)粒
用途：研究特定基因?qū)ψ允傻恼{(diào)控作用。

推薦：

pCMV-ATG5（貨號(hào)：22952）     

pCMV-Beclin1（貨號(hào)：24388）

pCMV-ULK1（貨號(hào)：27631）


（4）自噬相關(guān)基因敲除質(zhì)粒
用途：通過(guò)CRISPR/Cas9技術(shù)敲除自噬相關(guān)基因。

推薦：

lentiCRISPR v2（貨號(hào)：BR521）

pSpCas9(BB)-2A-GFP（貨號(hào)：BR080）


抗體產(chǎn)品推薦
抗體是驗(yàn)證自噬相關(guān)蛋白表達(dá)和功能的重要工具。以下是常用的自噬相關(guān)抗體：
（1）LC3抗體
用途：檢測(cè)LC3-I和LC3-II的轉(zhuǎn)化，評(píng)估自噬活性。

推薦抗體：

LC3B Polyclonal Antibody（貨號(hào)：Fab8383）


（2）p62/SQSTM1抗體
用途：檢測(cè)自噬底物的降解，評(píng)估自噬流。

推薦抗體：

SQSTM1/p62 rabbit pAb（貨號(hào)：Fab14039）


（3）ATG5抗體
用途：檢測(cè)ATG5蛋白表達(dá)，研究自噬體的形成。

推薦抗體：

ATG5 Rabbit Polyclonal Antibody（貨號(hào)：Fab1156）


（5）ULK1抗體
用途：檢測(cè)ULK1蛋白表達(dá)，研究自噬的起始。

推薦抗體：

ULK1 Polyclonal Antibody（貨號(hào)：Fab15637）

關(guān)于以上相關(guān)產(chǎn)品都可以在普拉特澤生物官網(wǎng)：http://www.hyjdss.com/

看完這些 “細(xì)胞清潔工” 的檢測(cè)門(mén)道，你是否好奇：

自噬流紊亂究竟如何推動(dòng)疾病進(jìn)程？或是哪種方法最適合你的研究？

歡迎在評(píng)論區(qū)分享你的腦洞或疑問(wèn)，說(shuō)不定下一篇深度解析，就為你量身定制！

別忘了點(diǎn)贊收藏，把這份 “自噬流研究指南” 分享給實(shí)驗(yàn)室伙伴～ 

六月丁香好婷婷-96精品国产久久久久久色婷婷-欧美国产一区二区三区四区-亚洲五月天蜜桃婷婷久久综合 | 国产欧美日韩成人在线精品-av中文字幕系列视频-免费人成黄页网站在线一区二区-超碰99 成人 | 精品日韩午夜在线-成人a级视频在线播放-久久国产精品成人免费古装-久久99精品久久久久久噜噜噜 | 97超碰在线中文字幕免费观看-日韩欧美黄色在线观看-亚洲熟女少妇乱综合图片区-日韩精品欧美一线 超碰人97在线观看-18禁看黄免费亚洲-伊人色综合久久天天伊人婷-亚洲乱女色熟一区二区三区 | 国产精品精品久久久-国产精品久久久久粉嫩小-91熟女激情视频-国产精品99久久久久久精品人 | 国产精精品在线资源-91在伦在色在线播放7777-蜜臀久久99精品久久久久久安男-91中文字幕免费观看 加勒比中文人妻字幕在线视频-国产一区二区三区福利视频在线观看-亚洲欧美日韩丝袜美腿第一页-日韩欧美二区在线播放 | 999久久久精品一区二区涩爱-欧美激情一区二区三区免费-日韩欧美国产成人一区-日韩中文字幕有码在线观看 | 日韩精品人妻26uuuu-欧美人妻cuckoid-色婷婷,婷婷色-伊人激情综合中文字幕 | 91久久国产综合久久久久蜜月-91精品国产高久久久久久69-热re99久久6国精品免费地址-日韩av精品夜夜网站 | 不卡一区二区视频日本-久青草免费啪视频在线观看-91成年人在线观看网站久色-日韩美女av写真 | 日韩少妇一区二区三区-av黄片啊啊啊啊啊-内射中出日韩在线观看视频-91久久人澡人人添人人爽乱 | 国产精品久久久久久亚洲欧洲-911精品产国品一二三产区-色婷婷在线观看免费视频-日韩欧美日韩精品在线 | 国产又黄又粗又猛大片-久久中文精品一区av-亚洲av国产视频-中文字幕在线制服丝袜 | 国产成人久久在线观看-色婷婷av一区二区三区av-日韩欧美一区二区中文字幕-超碰免费公开在线cao | 久久久精品一区二区三区三州-精品乱一区二区三区-欧美精品亚洲精品日韩精品-日韩av国产中文字幕 久久热这里只精品99-久久精品国产熟女精品-日本精品久久久久中文字幕-国产精品91在线播放 | eeuss丝袜诱惑-巨乳美女中出免费看-五月天中文字幕婷婷-五月婷婷六月丁香首页 | 蜜臀av性久久久久av蜜-岛国人妻中文字幕-国产又大又长又粗又猛又爽又黄-久久久久久人精品免费看 久久久久久欧美精品-欧美日韩一区二区三区高清视频-日韩爱爱免费网-超碰在线成人免费人妻 | 欧美激情戏一区二区三区-国产91极品啪啪啪-婷婷三月天激情四射-久久综合色影视电影 | 久久久亚洲毛片大全-婷婷在线播放av-欧美日韩字幕天堂中文-手机看片日韩福利盒子 | 亚洲在线欧美自拍偷拍-日韩美女三级电影网站-欧美日韩国产一区二区三区四匹不卡-2021国产精品自在自线 | 91福利体验区试看30秒-国产一区二区免费在线视频-久久综合色天天久久综合图片-久久久精品免费少妇 | 精品九九九九九香蕉臀蜜桃-久久精品不卡人妻-欧美日韩亚洲成人av-久久日韩熟女中文字幕av | 91性福利在线观看-久久精彩视频999-好男人精品在线播放-中文字幕漂亮的人妻 | 久久精品在线观看高清-国产成人精品视频午夜-精品国产18禁污污-成人免费午夜免费视频 | 欧美日韩三区二区一-一区二区 成人在线-日韩三级电影网一二区-色婷婷午夜免费专区精品视频 | 国产女同性恋一区二区-亚洲久久亚洲在-人妻日韩激情视频乱区区区-亚州国产av一区二区三区 | 欧美日韩人妻中文一区二区-国产又粗又硬又猛又大的视频-男人操女人逼逼文章-久久色资源中文字幕 综合久久高婷婷-日本一区久久久久久-日韩精品中文字幕人妻中出-日韩黄色蜜桃久久 | 精品国产91免费观看-国产又粗又猛又大爽又黄同志-人妻少妇精品性色αv在线-欧美日韩成人在线一区 | 五月天天天干天天日天天操-精品丝袜一区二区三区-久久精品麻豆日日躁夜夜-色综合久久天堂av | 久久久精选视频在线观看-91热视频在线观看-人妻精品一区二区专区-日韩精品网站在线播放 | 日韩无删减免费av-久久热这里只有精品在线-久久天天躁夜夜躁狠狠-蜜臀av性久久麻豆久久蜜臀aⅴ | 日韩美女高潮喷水免费看-国产精品久久久久久精品电影下载-亚洲一区二区三区在线观看播放-亚洲av,男人天堂 | 99久久99久久久精品齐齐鬼色-91精品国产综合久久久久久蜜月-久久亚洲国产精品-肥臀熟女一区二区三区肥女人 | 日本熟女五十路巨尻-日韩视频在线播放一区二区-黄色片黄色片黄色片亚洲黄色片-天堂网2016天堂 | av一区二区三区不卡-日韩一级免费视频播放-蜜臀国产免费一区二区-五月天久久精品国产亚洲av | 2020免费中文字幕在线观看-好看不卡的中文字幕-蜜桃视频一区二区三区四区av-91人人妻操人妻 | 色综合久久综合久久综合-99久久精品人妻少妇一-国产熟女乱综合一区二区三区-成人午夜激情在线观看 | 少妇中文字幕伦理-青青在线精品2018国产-欧美日韩另类人妻中字-国产又大又硬又粗又长又黄视频 | 麻豆成人黄色小视频网站-少妇人妻日韩中文字幕av黄黄-成人精品人妻在线观看-欧美丰满熟女性久久久 | 欧美日韩二区三区四区五区-日韩一卡二卡精品视频在线观看-日韩色图片自拍偷拍-av网站天堂在线1 | 日韩未删减版电影-天天爽天天日天天摸-久久精品久久精品久-成人精品网站在线观看 |